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本文標題："多聚酶濃度一般為0．5-5單位之間-材料顯微鏡"

發布者：yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間：2017-1-20 12:52:1

多聚酶濃度一般為0．5-5單位之間-材料顯微鏡　　

　　嚴格確定引物退火溫度，一般為50-60℃。較高溫度會增強引物與

模板的正確識別和結合，同時能降低引物3’端不正確核苷酸的錯誤延

伸。但溫度不能過高，過高溫度會破壞引物與模板結合。

　　延伸溫度通常約72cC。

　　(二)多聚酶濃度：一般為0．5-5單位之間。酶量少，合成產物量較

低，酶量高，會造成非特異性產物量增加。

　　(三)鎂離子：PCR擴增過程中鎂離子濃度應保持在0．5-2．5mmol／

L之間。鎂離子濃度可影響引物退火、模板和PCR產物的解離、產物特異

性、引物二聚體生成和酶活性等。

　　(四)平臺效應：平臺效應是指PER循環后期，合成產物到達0．3～1

pmol水平時，由于產物的堆積，使原來以指數增加的擴增速度變緩慢。

導致平臺效應因素包括：dNTP或引物等不斷消耗，反應物(帥或酶)的穩

定性，最終產物(焦磷酸鹽，雙鏈DNA)的阻化作用，非特異性結合和引

物二聚體參與競爭。

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